一、參考標準
《SN/T 2552.8-2010 乳及乳製品衛生微生物學檢驗方法 第8部分：普通變形杆菌和奇異變形杆菌檢驗》
二、生物學特性
變形杆菌為能活潑運動而又極為多形性的一群腸道菌，有球形和絲狀形，具有鞭毛、無莢膜、無芽胞、革蘭氏陰性，運動活潑。在固體培養基上呈擴散生長，形成遷徙生長現象。
三、檢驗程序
圖1 普通變形杆菌和奇異變形杆菌檢驗程序
四、檢驗方法和結果
1、選擇性增菌
普通變形杆菌和奇異變形杆菌在GN增菌液中36℃±1℃培養18-24h後生長渾濁，如圖2所示：
a:空白對照；b:普通變形杆菌；c:奇異變形杆菌
圖2 GN增菌液的培養結果
2、初步生化鑒定
①SS瓊脂試驗
取增菌液1環，劃線接種於SS平板上，於36℃±1℃培養18-24h，普通變形杆菌和奇異變形杆菌在SS平板上的典型菌落為：1mm-2mm大小、無色半透明或有黑色中心，邊緣整齊，表麵光滑的圓形菌落，如下圖所示：
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a:奇異變形杆菌 |
b:普通變形杆菌 |
②克氏雙糖培養基試驗
挑取SS平板上的可疑菌落，穿刺接種混合克氏雙糖鐵斜麵，接種時先在斜麵劃線，然後再穿刺到底層放入培養箱36℃±1℃培養18-24h，普通變形杆菌和奇異變形杆菌的試驗現象為：斜麵紅/底層黃（部分區域黑色），發酵葡萄糖但不發酵乳糖同時產生硫化氫和產氣，如圖3所示。
注意：能產生硫化氫的菌應及時觀察試驗結果，以免生成的硫化鐵形成黑色區域，遮蓋斜麵與底層的顏色影響判斷結果。
a:空白對照；b:普通變形杆菌；c:奇異變形杆菌
圖3 克氏雙糖的培養結果
③尿素瓊脂試驗
挑取SS平板上的可疑菌落，穿刺接種尿素瓊脂斜麵，接種時先在斜麵劃線，然後再穿刺到底層放入培養箱36℃±1℃培養18-24h，普通變形杆菌和奇異變形杆菌的試驗現象為尿素培養基變玫紅，如圖4所示：
空白對照；b:普通變形杆菌；c:奇異變形杆菌
圖4 尿素培養基的培養結果
④苯丙氨酸脫氨酶培養基試驗
挑取SS平板上的可疑菌落，接種在苯丙氨酸脫氨酶培養基斜麵劃線，然後放入培養箱36℃±1℃培養18-24h，培養結束後滴加4-5滴苯丙氨酸指示劑，使其覆蓋培養基表麵，1min-5min呈現綠色則為陽性，如圖5所示：
a:空白對照；b:普通變形杆菌；c:奇異變形杆菌
圖5 苯丙氨酸脫氨酶培養基的培養結果
3、進一步的生化鑒定
符合上一步要求的可疑菌落需進一步進行其他生化試驗。
①靛基質試驗
將菌接種於胰蛋白水培養基中，放入培養箱36℃±1℃培養18-24h，滴加Kovacs氏靛基質試劑，立即觀察反應結果。普通變形杆菌為玫紅色環，為陽性；奇異變形杆菌為黃色環，為陰性，如圖6所示：
a:空白對照；b:奇異變形杆菌；c:普通變形杆菌；
圖6 靛基質的培養結果
②鳥氨酸脫羧酶試驗
將菌接種於鳥氨酸脫羧酶生化管中，加無菌液體石蠟覆蓋培養基液體表麵，放入培養箱36℃±1℃培養18-24h，接種普通變形杆菌的培養基呈陰性，培養基變黃；接種奇異變形杆菌的培養基呈陽性，培養基為紫色，如圖7所示：
a:空白對照；b:奇異變形杆菌；c:普通變形杆菌
圖7 鳥氨酸脫羧酶的培養結果
③甘露醇試驗
將菌接種於鳥氨酸脫羧酶生化管中，放入培養箱36℃±1℃培養18-24h，接種奇異變形杆菌和普通變形杆菌的培養基都呈陰性，培養基顏色為藍色或藍綠色，如圖8所示：
a:空白對照；b:奇異變形杆菌；c:普通變形杆菌
圖8 甘露醇的培養結果
④氧化酶試驗
變形杆菌氧化酶試驗不變色，為陰性，銅綠假單胞菌為陽性變藍，如圖9所示：
a:銅綠假單胞菌10104；b:奇異變形杆菌
圖9 鳥氨酸脫羧酶的培養結果
注：普通變形杆菌和奇異變形杆菌生化鑒定表如下：
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生化反應 |
明膠液化 |
甘露醇 |
靛基質 |
鳥氨酸脫羧酶 |
麥芽糖 |
木糖 |
鼠李糖 |
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普通變形杆菌 |
+ |
- |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
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奇異變形杆菌 |
+ |
- |
- |
+ |
- |
+ |
- |
注：本文屬betway必威西汉姆联生物原創，未經允許不得轉載。
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