一、用途
用於大腸杆菌O157：H7菌的選擇性分離培養。
二、實驗原理
蛋白腖、䏡腖提供氮源、維生素和生長因子；氯化鈉維持均衡的滲透壓；山梨醇為可發酵的糖類；牛膽鹽、結晶紫、亞碲酸鉀和頭孢克肟抑製革蘭氏陽性菌；中性紅為pH指示劑；瓊脂是培養基的凝固劑。
三、培養基配方（g/L）
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蛋白腖 |
17.0 |
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䏡腖 |
3.0 |
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山梨醇 |
10.0 |
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牛膽鹽 |
1.5 |
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氯化鈉 |
5.0 |
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中性紅 |
0.03 |
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結晶紫 |
0.001 |
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瓊脂 |
13.5 |
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pH7.2±0.2 |
25℃ |
四、試驗方法
1、稱取本品51.5g，加熱溶解於1000ml蒸餾水中，分裝三角瓶，每瓶200ml，121℃高壓滅菌15分鍾，冷卻至45-50℃左右時，加入一支山梨醇麥康凱瓊脂添加劑（含頭孢克肟0.01mg，亞碲酸鉀0.5mg），混勻，傾入無菌平皿，備用；
2、製備質控菌液；
3、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml，均勻塗布於平板上，每一稀釋度接種兩個平板；
4、用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環，將接種環接觸容器邊緣3次去除多餘液體，在平板表麵劃六條平行直線，同時接種兩個平板；
5、36±1℃倒置培養基培養18-24小時，記錄實驗結果。
五、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株，在36±1℃需氧培養18-24小時：
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
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金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
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大腸埃希氏菌O157 |
ATCC35150 |
10-100 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
無色菌落，褐色中心 |
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傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
定性 |
- |
粉紅色菌落 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
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定性 |
- |
粉紅色菌落，周圍有膽鹽沉澱 |
山梨醇麥康凱瓊脂質控結果：
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大腸埃希氏菌O157 無色菌落，褐色中心 |
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大腸埃希氏菌 粉紅色菌落，周圍有膽鹽沉澱 |
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傷寒沙門氏菌 粉紅色菌落 |
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金黃色葡萄球菌 抑製 |
六、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
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