一、試驗用途
該培養基主要用於單增李斯特氏菌增菌培養。
二、檢驗原理
胰蛋白腖、大豆蛋白腖和酵母浸粉提供氮源、維生素和生長因子；氯化鈉維持均衡的滲透壓；葡萄糖提供碳源；磷酸氫二鉀為緩衝劑。
三、培養基配方（g/L)
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大豆蛋白腖 |
3.0 |
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胰蛋白腖 |
17.0 |
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酵母浸粉 |
6.0 |
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葡萄糖 |
2.5 |
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氯化鈉 |
5.0 |
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磷酸氫二鉀 |
2.5 |
|
pH值7.3±0.1 |
25℃ |
四、試驗方法
1.稱取本品3.6g，加熱攪拌溶解於100ml蒸餾水中，分裝試管，每支10ml，121℃高壓滅菌15分鍾，備用；
2.將質控菌株稀釋至合適梯度，用移液槍吸取指控菌種100微升加入試管中；
3.將接好菌種的試管放置於30±1℃需氧環境中培養24-48小時。
五、實驗結果
接種以下質控菌株，放置在30±1℃培養24-48h。
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
指控結果 |
其他特征 |
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單增李斯特氏菌 |
ATCC19114 |
10-100 |
TSA |
半定量 |
混濁度2 |
/ |
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英諾克李斯特氏菌 |
ATCC33090 |
10-100 |
TSA |
半定量 |
混濁度2 |
/ |
含0.6%酵母膏的胰酪腖大豆肉湯實驗結果如下圖：
a:單增李斯特氏菌; b:英諾克李斯特氏菌; c:空白對照
六、注意事項
1.該菌營養要求不高，兼性厭氧，最適在含有CO2的微需氧環境中生長，生長溫度範圍—1.5℃-45℃，該培養基的適宜培養溫度為30±1℃。
2.單增李斯特氏菌有時生長緩慢，培養時間應為24-48小時。
3.該培養基僅能作為單增李斯特氏菌的增菌培養，要進一步確認是否是單增李斯特氏菌，還需作進一步生化實驗確認。
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