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霍亂雙糖鐵瓊脂實驗原理及現象

楊小潔
錄入時間:2020-12-4 10:51:58 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、實驗原理:


 本培養基用於霍亂弧菌的生化試驗(SN標準)

  

 牛肉粉、酵母粉、月示蛋白腖、蛋白腖提供氮源、維生素和礦物質,乳糖、葡萄糖是可發酵的糖,氯化鈉維持均衡的滲透壓,瓊脂是培養基的凝固劑。


二、培養基配方(g/L):


成分

用量

牛肉粉

3.0

酵母粉

3.0

月示蛋白腖

15.0

蛋白腖

5.0

乳糖

5.0

葡萄糖

1.0

硫酸亞鐵

0.2

氯化鈉

20.0

硫代硫酸鈉

0.3

瓊脂

12.0

酚紅

0.024

pH7.2-7.6
25℃


三、實驗方法:



 稱取本品 64.5g,加熱溶解於1000ml 蒸餾水中,分裝於試管內的 3/4 左右高度,121℃高壓滅菌 15 分鍾,放置高層斜麵備用。


四、結果觀察與解釋

 

 按標簽用法製備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時。 

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

生長情況

其它特征

霍亂弧菌非01群

HB081127A-1

/

+++

K/A,H2S(-),產氣(-)

副溶血性弧菌

ATCC17802

/

+++

K/A,H2S(-),產氣(-)

溶藻弧菌

ATCC17749

/

+++

K/A,H2S(-),產氣(-)

大腸埃希氏菌

ATCC25922

/

+++

A/A,H2S(-),產氣(+)

鼠傷寒沙門氏菌

ATCC14028

/

+++

K/A,H2S(+),產氣(+)

普通變形杆菌

ATCC13315

/

+++

K/A,H2S(+),產氣(+)


  

 實驗結果現象與說明:

 1.霍亂弧菌非01群、副溶血性弧菌、溶藻弧菌

 斜麵紅/底層黃:發酵葡萄糖但不發酵乳糖,是不發酵乳糖的特征的菌類。

 2.大腸埃希氏菌

 斜麵黃/底層黃:既發酵乳糖也發酵葡萄糖,產生大量的酸使整個培養基呈黃色,同時有產氣現象。

 3.鼠傷寒沙門氏菌、普通變形杆菌

 斜麵紅/底層黃(部分區域黑色):發酵葡萄糖但不發酵乳糖同時產生硫化氫,是產硫化氫不發酵乳糖特征。

 硫化氫的產生:這類菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氫,硫化氫和培養基中的鐵鹽反應生成黑色的硫化亞鐵沉澱。


五、注意事項


 能產生硫化氫的菌應及時觀察試驗結果,以免生成的硫化鐵形成黑色區域,遮蓋斜麵與底層的顏色影響判斷結果。


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 注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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