一、培養基用途
用於動力觀察,菌種保存,H抗原位相變異試驗等。
二、培養基基礎成分(g/L)
蛋白腖 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
瓊脂 |
4.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
pH值7.4±0.1 |
25℃ |
三、試驗原理
蛋白腖和牛肉膏粉提供氮源、維生素、礦物質;氯化鈉維持均衡的滲透壓;較少量的瓊脂作為培養基的凝固劑。
四、培養基用法
稱取本品22.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,煮沸溶解,分裝小試管,121℃高壓滅菌15分鍾,直立凝固,備用。
此溶液相當於多價鞭毛抗原(H)鑒定中,0.3%~0.4%半固體瓊脂的小玻管中的溶液。
如需配置0.55%~0.65%半固體瓊脂平板,需在每1000ml溶液中添加1.5~2.5g瓊脂即可。
五、質控
(1)製備好的培養基,穿刺接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養24-48小時。質控標準如下:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控結果 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
>5000 |
/ |
定性 |
陽性,擴散生長 |
/ |
蠟樣芽胞杆菌 |
CMCC(B)63303 |
>5000 |
// |
定性 |
陽性,擴散生長 |
// |
福氏誌賀氏菌 |
ATCC12022 |
>5000 |
/ |
定性 |
陰性,沿穿刺線生長 |
|
宋內氏誌賀氏菌 |
ATCC25931 |
>5000 |
/ |
定性 |
陰性,沿穿刺線生長 |
/ |
(2)質控菌株在該培養基中培養試驗結果如下圖:質控陽性菌除了在穿刺接種的穿刺線上生長外,在穿刺線的兩側均可見羽毛狀或雲霧狀渾濁生長;質控陰性菌隻沿穿刺線呈明顯的線狀生長。
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