一、試驗原理:
尿素酶瓊脂為生化培養基,用於細菌脲酶檢測(GB、SN標準)。
蛋白腖作為培養基中的基礎營養物質,提供細菌生長所需的碳氮源、維生素和其他的生長因子;氯化鈉維持培養基體係的滲透壓平衡;葡萄糖為可發酵糖類;磷酸二氫鉀作為培養基的緩衝劑;酚紅為pH指示劑,瓊脂是培養基的凝固劑。有些細菌能產生尿素酶,將尿素分解,產生2個分子的氨,使培養基變為堿性,酚紅呈粉紅色。尿素酶不是誘導酶,不論底物尿素是否存在,細菌均能合成此酶。
二、培養基配方(g/L):
蛋白腖 |
1.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
磷酸二氫鉀 |
2.0 |
苯酚紅 |
0.012 |
瓊脂 |
15.0 |
pH值7.0±0.1 |
(25℃) |
三、試驗方法:
稱取本品2.1g,加熱攪拌溶解於95mL蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鍾,冷至50-55℃,加入無菌的40%尿素水5mL,混勻,分裝試管,放成斜麵備用。
四、試驗結果判斷:
接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養24±2小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
+++ |
變黃,陰性 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC 14028 |
/ |
+++ |
變黃,陰性 |
奇異變形杆菌 |
ATCC 14153 |
/ |
+++ |
變紅,陽性 |
普通變形杆菌 |
CMCC(B) 49027 |
/ |
+++ |
變紅,陽性 |
尿素酶瓊脂質控結果
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