一、試驗原理：
用於食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測和計數(GB/T4789.32－2002)。
胰酪腖提供氮源、維生素和礦物質滿足細菌生長的需求；氯化鈉可維持均衡的滲透壓；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀是緩衝劑；月桂基硫酸鈉抑製革蘭氏陽性菌；大腸菌群可產生β-半乳糖苷酶，分解培養基中的酶底物茜素-β-D-半乳糖苷(Aliz-gal)，使茜素遊離，並與培養基中的鋁、鉀、鐵、銨離子結合形成紫色(或紅色)的螯合物，使菌落呈現相應的顏色。
二、培養基配方（g/L）：
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胰酪腖 |
20.0 |
|
氯化鈉 |
5.0 |
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磷酸氫二鉀 |
2.75 |
|
磷酸二氫鉀 |
2.75 |
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月桂基硫酸鈉 |
0.1 |
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異丙基硫代半乳糖苷 |
0.03 |
|
硫酸鋁鉀 |
0.5 |
|
檸檬酸鐵銨 |
0.5 |
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瓊脂 |
15.0 |
|
茜素-β-D-半乳糖苷 |
0.05 |
|
pH 7.1±0.1 |
25℃ |
三、試驗方法：
1、稱取本品46.7g，加熱溶解於1000ml蒸餾水中，116℃高壓滅菌10分鍾，冷卻至50℃左右時，傾入無菌平皿，備用。
2、製備好的平板保存於2-8℃，應避免光線直接照射。幹燥培養基應放置於陰暗幹燥處，室溫保存。
4、使用前，把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。
5、製備質控菌液。選擇合適稀釋度的質控菌液0.1ml，均勻塗布於平板上，每一稀釋度接種兩個平板。用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環，將接種環接觸容器邊緣3次去除多餘液體，在平板表麵劃六條平行直線，同時接種兩個平板。36±1℃℃倒置培養基培養18-24小時，記錄實驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株，36±1℃需氧培養18-24小時：
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
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金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
|
傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
定性 |
- |
粉色菌落 |
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大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落 |
|
陰溝腸杆菌 |
ATCC23355 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
紫紅色菌落 |
|
弗氏檸檬酸杆菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落 |
a：大腸埃希氏菌，b:金黃色葡萄球菌，c:傷寒沙門氏菌，d:陰溝腸杆菌，e：弗氏檸檬酸杆菌，f:空白對照
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
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