微生物的最顯著特點就是個體徽小，必須借助顯微鏡才能觀察到它們的個體形態和細胞結構。熟悉顯微鏡和掌握其操作技術是研究微生物不可缺少的手段。本部分將介紹目前微生物學研究中最常用的普通光學顯微鏡及電子顯微鏡、相差顯徽
操作步驟
1 ．觀察前的準備
( l ）顯微鏡的安置 顯微鏡於平整的實驗台上，鏡座距實驗台邊緣約3 一4 cm ．鏡檢時姿勢要端正。
取放顯微鏡時應一手握住鏡翻，一手托住勝座、使顯橄翔保持直立、平穩。切忌用單手拎提；且不論使用單藺顯微鏡或雙筒顯微鏡均應雙眼同時睜開觀典，以減少眼叻使勞．也便幹邊觀索邊繪圈或記錄．
( 2 ）光源調節安裝在鏡座內的光源燈可通過調節電壓以獲得適當的照明亮度，而使用反光鏡采集自然光或燈光作為照明光源時，應根據光源的強度及所用物鏡的放大倍數選用凹麵或凸麵反光鏡並調節其角度，使視野內的光線均勻，亮度適宜。
( 3 ）根據使用者的個人情況，調節雙筒顯微鏡的目鏡雙筒顯微鏡的目鏡間距可以適當調節，而左目鏡上一般還配有曲光度調節環，可以適應眼距不同或兩眼視力有差異的不同觀察者．侈）聚光器數值孔徑值的調節調節聚光器虹彩光圈值與物鏡的數值孔徑值相符或略低，有些顯微鏡的聚光器隻標有最大數值孔徑值，而沒有具體的光圈數刻度．使用這種顯微鏡時可在樣品聚焦後取下一目鏡，從鏡筒中一邊看著視野，一邊縮放光圈，調整光圈的邊緣與物鏡邊緣黑圈相切或略小於其邊緣．因為各物鏡的數值孔徑值不同，所以每轉換一次物鏡都應進行這種調節．
2 ．顯微觀察
在目鏡保持不變的情況下．便用不同放大倍數的物鏡所能達到的分辨率及放大率都是不同的，一般情況下，特別是初學者，進行顯微觀察時應遵守從低倍鏡到高倍鏡再到油鏡的觀察程序。因為低倍數物鏡視野相對大，易發現目標及確定檢查的位1 ,
( 1 ）低倍鏡觀寮將金黃色有萄球菌染色標本玻片裏於載物台上．用標本夾夾住，移動推進器使觀察對象處在物鏡的正下方．下降10 丫物鏡，使其接近標本，用粗調節器怪怪升起鏡筒，使標本在視野中初步聚焦，再使用細調節器調節圖像清晰．通過玻片夾推進器慢，移動玻片，認真觀察標本各部位，找到合適的目的物，仔細觀察並記錄所觀察到的結果．
( 2 ）高倍鏡觀察在低倍鏡下找到合適的觀察目標並將其移至視野中心後，輕輕轉動物鏡轉換器將高倍鏡移至工作位置．對聚光器光圈及視野亮度進行適當調節後微調細調節器便物像清晰，利用推進器移動標本仔細觀察並記錄所觀察到的結果．
( 3 〕 油鏡觀察 在高倍鏡或低倍鏡下找到要觀察的樣品區域後，用粗調節器將鏡筒升高，然後將油鏡轉到工作位置。在待觀察的樣品區域加滴香柏油，從側麵注視，用粗調節器將鏡筒小心地降下、使油鏡浸在鏡油中井幾乎與標本相接。將聚光器升至最高位置並開足光圈，若所用聚光器的數值孔徑值超過1 , O ，還應在聚光鏡與載破片之間也加滴香柏油，保證其達到最大的效能．調節照明使視野的亮度合適，用粗調節器將鏡簡徐徐上升，直至視野中出現物像並用細調節器使其清晰準焦為止．．
3 顯微鏡用畢後的處理
( I ）上升鏡筒，取下載玻片‘
( 2 ）用舞鏡紙拭去鏡頭上的鏡油，然後用擦鏡紙蘸少許二甲笨〔 香拍油溶於二甲苯》 擦去鏡頭上殘留的油跡，最後再用幹淨的擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。
切忌用手或井他紙報拭鏡頭．以免使鏡頭沾上汙益或產生劃液．影響觀察．
實驗報告
1 ．結果
分別繪出你在低倍鏡、高倍鏡和油鏡下觀察到的金黃色有萄球菌、枯革芽孢杆菌、鏈鑲菌及青黴的形態，包括在三種情況下視野中的變化，同時注明物鏡放大倍數和總放大率。2 ．思考題
( l ）用油鏡觀察時應注意哪些問題寧在載玻片和鏡頭之間加滴什麽油？起什麽作用？
( 2 ）試列表比較低倍鏡、高倍鏡及油鏡各方麵的差異。為什麽在使用高倍鏡及油鏡時應特別注意避免粗調節器的誤操作？
( 3 ）什麽是物鏡的同焦現象？它在顯微鏡觀察中有什麽意義？
( 4 ）影響顯微鏡分辨率的因素有哪些呀
( 5 ）根據你的實驗體會，談談應如何根據所觀察微生物的大小，選擇不同的物鏡進行有效的觀察．
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