1.方法一(紙條法)
(1)培養基
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蛋白腖 |
10g |
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NaCl |
5g |
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牛肉膏 |
10g |
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半胱氨酸 |
0.5g |
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蒸餾水 |
1000ml |
pH 7.0～7.4.分裝試管，每管液層高度4～5 cm,112℃滅菌20～30 min。另外將普通濾紙剪成0.5～1cm寬的紙條，長度根據試管與培養基高度而定。用5%～10％的醋酸鉛將紙條浸透，然後用烘箱烘幹，放於培養皿中滅菌備用。
（2）接種與觀察：用新鮮斜麵培養物接種培養基。接種後，用無菌攝子夾取一條醋酸鉛紙條用棉塞塞緊，使懸掛於管中，下端接近培養基表麵，不接觸液麵，適溫培養。於接種後3,7,14天觀察。紙條變黑色者為陽性，不變者為陰性。
（3）注意事項：①此方法比較敏感，本培養基不適用於腸杆菌科。 ②紙條高度應放置適當，離液麵太遠影響靈敏度，太近容易濺濕。同時移動試管架時也要平穩。③除空白對照外，應放陰性對照。
2.方法二（腸杆菌）
（1）培養基
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牛肉膏 |
7.5g |
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蛋白腖 |
10g |
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NaCl |
5g |
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明膠 |
100-120g（或瓊脂15g） |
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10%FeCl2（培養基滅菌後無菌加入） |
5ml |
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蒸餾水 |
1000ml |
pH 7.0,112℃滅菌20 min。
在明膠培養基尚未凝固時，加入新製備的過濾滅菌的FeCl2,用無菌試管分裝，培養基高度約為4-5 cm,立即置冷水冷卻凝固。
（2）接種與觀察：用穿刺法接種，30℃培養，1,3,7天，觀察，變黑者為陽性，不變為陰性。
（3）注意事項：①此方法適於腸杆菌科細菌的鑒定。②在我們實驗室中用的是硫酸亞鐵代替氯化亞鐵。③可同時測定明膠液化，20℃培養。
本文節選自《常見細菌係統鑒定手冊》第十四章。
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