1.方法一
(1)培養基
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蛋白腖 |
1g |
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NaCl |
5g |
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葡萄糖 |
1g |
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KH2PO4 |
2g |
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酚紅（0.2%酚紅水溶液） |
6ml |
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瓊脂 |
20g |
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蒸餾水 |
1000ml |
滅菌後調pH至6.8-6.9使培養基呈橘黃色或微帶粉紅色為宜，分裝試管，分裝散以適於擺斜麵為度，l15℃蒸氣滅菌30min。20％的尿素溶液過濾滅菌後，待基礎培養基冷卻到50-55℃時，將滅菌的尿素溶液加到培養基中，終濃度為2%，然後擺成較大的斜麵。
(2)結果觀察
接種後適溫培養，分別於2h、4h過夜觀察。陰性結果要觀察4天，培養基呈桃紅色者為陽性，培養基顏色不變者為陰性。
(3)注意事項
①該實驗應有不加尿素的空白對照（尤其是測定假單胞菌時）；②應該有已知的陽性菌對照。
2.方法二
將測定菌接在營養瓊脂斜麵上，在第3天和第7天進行脲酶的測定。方法是：在空試管中，將斜麵菌苔做成2ml濃菌懸液，加入一滴酚紅指示劑，調pH到7,即酚紅剛剛轉黃呈橙紅色，再將此菌懸液分作兩份，在其中的一管加入少許結晶的尿素約0.05-0.1g,另一管不加尿素作為對照。如加尿素的試管的幾分鍾變堿，酚紅指示劑變紅，則表示測定菌為脲酶陽性。不變者，則為陰性。
本文節選自《常見細菌係統鑒定手冊》第十四章。
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