1.培養基
（1）休和利夫森二氏培養基
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蛋白腖 |
2g |
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NaCl |
5g |
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K2HPO4 |
0.2g |
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葡萄糖 |
10.0g |
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瓊脂 |
6.0g |
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溴百裏酚藍（溴麝香酚藍），1%水溶液3ml （先用少量95%乙醇溶解後，再加水配成1%的水溶液） |
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| 蒸餾水1000ml | |
pH 7.0-7.2,分裝試管，培養基高度約4.5cm, 115℃蒸氣滅菌20min。
（2）博德和霍爾二氏培養基
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NH4H2PO4 |
0.5g |
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酵母膏 |
0.5g |
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K2HPO4 |
0.2g |
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葡萄糖 |
10.0g |
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瓊脂 |
6.0g |
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溴百裏酚藍（溴麝香酚藍），1%水溶液3ml （先用少量95%乙醇溶解後，再加水配成1%的水溶肥也） |
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蒸餾水 |
1000ml |
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pH 7.0-7.2,分裝，滅菌同上。
2.接種
（1）以18-24h幼齡菌種作種子，穿刺接種，每株4支。
（2）其中2支用滅菌的凡士林石蠟油（熔化的2/3凡士林中加入1/3液體石蠟，高壓滅菌）封蓋，約0.5-lcm厚，以隔絕空氣為閉管。另2支不封油為開管，同時還要有不接種的閉管和開管作對照。
（3）適溫培養1,2,3,7,14天觀察結果。
3. 結果檢查
（1）隻有開管產酸變黃者為氧化型；開管和閉管均產酸變黃者為發酵型。
（2）本實驗可同時觀察細菌的運動性，觀察運動性時瓊脂軟硬必須合適，我們所用的瓊脂（海燕牌瓊脂條）以0.5%-0.6％為宜，其他牌號的瓊脂則須經實驗決定使用濃度。瓊脂的濃度以放倒試管不流動，輕輕敲打則瓊脂柱破碎為宜。
（3）如培養基製好後，在溫度較低的地方存放，在使用前應在沸水中融化，並用冷水速凝後立即使用。否則溶於培養基中的空氣會幹擾觀察發酵產酸的結果。
本文節選自《常見細菌係統鑒定手冊》第十四章。
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