1.試劑
鹽酸二甲基對苯撐二胺（或四甲基對苯撐二胺）1％水溶液於茶色瓶中在冰箱中貯存。
2.操作
在幹淨培養皿裏放一張濾紙，滴上二甲基對苯撐二胺的1％水溶液，僅使濾紙濕潤即可，不可過濕。用白金絲接種環（不可用鎳鉻絲）取18-24 h的菌苔，塗抹在濕潤的濾紙上，在10s內塗抹的菌苔現紅色者為陽性，（四甲基對苯撐二胺呈藍色）10～60s現紅色者為延遲反應，60s以上現紅色者不計，按陰性處理；
3.氧化酶試紙製作及測定法
將質地較好的濾紙（如新華1號濾紙）用1％鹽酸二甲基對苯撐二胺浸濕，在室內懸掛風幹。幹後，剪裁成適當大小的紙條，放在有橡皮塞的試管中密封保存，在4℃冰箱中可存數月，使用前用白金絲接種環將菌苔抹在紙條上，於10s內出現紅色為氧化酶陽性。如紙條儲存過久，顏色不明顯，則不宜使用。
4.操作注意事項
（1）二甲基對苯撐二胺溶液易於氧化，一般可於冰箱中貯存二周。如溶液顏色轉紅褐色，則不宜使用。
（2）鐵、鎂等金屬可催化二甲基對苯撐二胺呈紅色，故不宜用電爐絲或鐵絲等取菌苔。如無白金絲，可用玻棒或滅菌牙簽取菌苔塗抹。
（3）在濾紙上滴加試液以剛剛濕潤為宜。如濾紙過濕，妨礙空氣與菌苔接觸，則延長顯色時間，造成假陰性。
本文節選自《常見細菌係統鑒定手冊》第十三章。
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