（一）光學顯微鏡下觀察法
1.插片法 適用於觀察放線菌的自然生長狀態
在適合菌種生長的固體培養基上，塗布接種觀察的菌株，然後用攝子把滅過菌的蓋玻片以45°角插入平板中，然後置適宜的生長溫度培養（一般一個平板可插6～8片）。 在不同生長期取出蓋玻片，用結晶紫染lmin、水洗、幹燥，在光學顯微鏡下觀察，攝像。
2.蓋片法
用適合菌種生長的固體培養基倒平板，塗布接種上需觀察的菌株，然後用無菌小刀在平板正中間切去1cm左右的瓊脂塊，用鑷子夾一塊無菌載玻片蓋於有溝的瓊脂平板上，置適當溫度下培養。菌株會沿玻片生長。生長好後取出載玻片，結晶紫染色1 min、水洗、幹燥。在光學顯微鏡下觀察到生長完整的氣生菌絲體，同時攝影。
（二）透射電子顯微鏡觀察法
1.材料
透射電鏡一台，載樣銅網膜，火棉膠。
2.方法
（1）火棉膠準備：2g火棉膠溶於100 ml醋酸異戊酣中。
（2）載樣膜的製備：先把銅網膜用濃硫酸浸漂2min,再用水洗數次，最後將洗淨的銅網膜鋪在有濾紙的培養皿中。輕輕注入無菌水，取配好的火棉膠液滴一滴在水麵上，由於火棉膠在水麵上的表麵張力形成一薄膜，將第一、二次的膜除掉，薄膜形成後迅速用吸管在培養皿的邊緣處吸去水分，直至吸幹，使膜緊緊貼在銅網上為止，室溫幹燥備用。
（3）點樣：用生長豐茂的菌株製成菌懸液，用毛細管吸取菌液並滴在銅網上。也可以用貼印法，即用製好的銅網在有氣生菌絲體的菌塊上輕輕印一下，然後，在光學顯微鏡下先檢查一下網是否完整，及蔭是否貼上或分布均勻。然後噴碳或投影（通常用於細菌鞭毛觀察），便可在透射電子顯微鏡下觀察或攝影。
（三）掃描電鏡觀察法
掃描電鏡可以觀察到菌體表麵的立體形象，它通過三維形象逼真地反映出樣品表麵結構的凹凸不平，如細菌的形態、鞭毛結構、放線菌孢子的表麵裝飾物等都以立體狀反映出來。
1.材料
掃描電鏡一台，臨界點幹燥器，白金粉，戊二醛，乙醇。
2.方法
菌株培養於適宜生長的平板培養基上-待生長好後用小刀切成0.5～0.7cm3的方塊一然後小刀削薄→置瓷染色盆中→立即加2.5％戊二醒固定1.5h→吸去戊二醛→分別加30%、50%、70%、90%、100％乙醇各脫水15min→取出放於圓形容器中→臨界點幹燥1h→取出貼於一圓形銅片上→白金濺射噴鎖，厚度約2～5mm→置掃描電鏡下觀察及攝影。
本文節選自《常見細菌係統鑒定手冊》第十二章。
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