用途:用於芽孢杆菌的生化鑒定。組成:厭氧生長、v-p(需滴加v-p試劑盒)、檸檬酸鹽、丙酸鹽、D-木糖、L-阿拉伯糖、D-甘露醇、明膠液化、7%氯化鈉生長、PH5.7生長、硝酸鹽還原(需滴加硝酸鹽還原試劑盒及鋅粒)、澱粉水解。
添加劑:每盒鑒定條需配套
使用說明:
1.實驗準備:從包裝盒中取出一條生化鑒定條,打開蓋子,用打孔器開孔。如果染菌或變色,
則不能使用,重新拿一條。注:打孔器用75%酒精擦拭後使用;本鑒定條需配套硝酸鹽還原試劑、V-P試劑和盧戈氏碘液使用。
2.接種方法:
挑取可疑菌落,接種於營養瓊脂斜麵或平板,36±1℃培養24h,接種至生化鑒定條。若試劑條中內容物為液體,采用菌懸液法接種;若內容物為固態,則采用“之”字形劃線接種或穿刺接種。
菌懸液法:取一內盛2ml無菌水或無菌生理鹽水試管,用接種針或接種環從營養瓊脂平板上挑取單個菌落至無菌生理鹽水中仔細研磨製成0.5麥氏濁度的均一細菌懸液,加入至V-P、檸檬酸鹽、明膠、7%氯化鈉、pH5.7、硝酸鹽還原、澱粉水解孔內,每孔加入100ul菌懸液。
穿刺和劃線接種:使用接種針挑取菌落“之”字形劃線至厭氧生長生化管內;使用接種針挑取菌落垂直穿刺於丙酸鹽、D-木糖、L-阿拉伯糖、D-甘露醇孔中。
3.接種完後做好標記,蓋上蓋子,放入底托中,放置36±1℃培養;厭氧生長生化管需放入厭氧環境中培養。
4.培養結束後,放在記錄卡上觀察。
點擊下載生化鑒定條使用說明書(HBIG14):/xiazai-download.asp?id=147
產品名稱
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結果判斷
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培養時間
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備 注
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陽性
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陰性
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厭氧生長
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生長良好
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不生長
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18-24h
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需放入厭氧環境中培養。
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V-P
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變紅
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不變色
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2-4天
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培養結束後,滴加VP試劑(甲液6滴,乙液2滴),搖勻後繼續培養0.5-4h,4h內不變色為陰性,變紅為陽性。
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檸檬酸鹽
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變藍
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變黃色或不變色
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48h
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丙酸鹽
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變藍
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變黃色或不變色
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48h
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有時需延長培養至96h。
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D-木糖
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變黃
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紫紅色或不變色
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2-5天
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L-阿拉伯糖
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變黃
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紫紅色或不變色
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2-5天
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D-甘露醇
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變黃
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紫紅色或不變色
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2-5天
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明膠液化
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液化
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不液化
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48-96h
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培養結束後,置於4℃冰箱放置20min,若變為固態則為陰性,若仍然為液態則為陽性。
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7%氯化鈉生長
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渾濁
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澄清或輕微渾濁
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2-7天
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pH5.7生長
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渾濁
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澄清或輕微渾濁
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24-48h
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硝酸鹽還原
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滴加試劑變紅,或滴加試劑不變紅,加入鋅粒仍然不變紅
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滴加試劑不變紅,繼續加入鋅粒後變紅
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2-4天
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滴加硝酸鹽還原試劑甲、乙液各2-3滴觀察結果。若變紅,則為陽性;若不變紅,繼續加入鋅粒,加入鋅粒後變紅為陰性,不變紅為陽性。
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澱粉水解
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不變藍
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變藍
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48-96h
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培養結束後需滴加盧戈氏碘液。
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HBI芽孢杆菌生化鑒定條質量控製:
按使用說明進行操作,接種後置36±1℃培養。
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