操作視頻|血漿凝固酶實驗
【產品名稱】
通用名稱:凍幹兔血漿
【包裝規格】
0.5ml×10支
【預期用途】
用於金黃色葡萄球菌的血漿凝固酶試驗(GB、SN標準)。
【檢驗原理】
細菌生成血漿凝固酶後釋放於血漿中,稱為遊離凝固酶,不直接作用到血漿纖維蛋白原上,而是被血漿中的致活劑(即凝固酶致活因子)激活後變成耐熱的凝固酶樣物質,此物質纖維蛋白原變為固態纖維蛋白,血漿因而凝固。致病性葡萄球菌能產生凝固酶。
【主要組成成份】
凍幹兔血漿、檸檬酸鈉。
【儲存條件及有效期】
1.2℃-25℃避光保存,環境濕度≤80%。
2.在儲存條件下有效期為一年。
【樣本要求】
樣本的收集、儲存、處理、運輸應嚴格執行無菌操作,避免汙染,
【檢驗方法】
方法1:按箭頭方向掀開並撕下鋁箔蓋,每支西林瓶中加入0.5ml滅菌生理鹽水輕微搖晃至完全溶解,然後加入0.3ml(SN))或0.2ml-0.3ml(GB)肉湯培養物,充分混合後,置36℃±1℃培養。
方法2:按箭頭方向掀開並撕下鋁箔蓋,每支西林瓶中加入0.8ml肉湯培養物輕微搖晃至完全溶解,置36℃±1℃培養。
【參考值(參考範圍)】
本品的空白對照應無菌生長。
【檢驗結果的解釋】
每半小時觀察一次,觀察6 h,如呈現凝固(即傾斜或倒置時,呈現凝塊)或凝固體積大於原體積的一半,被判定為陽性結果。
【注意事項】
1、可疑菌落需同時接種在5ml的BHI肉湯中和營養瓊脂上
Baird-Parker平板上或血平板上的可疑菌落需同時接種在5ml的BHI肉湯中和營養瓊脂上,如果出現可疑菌在BHI肉湯出現生長狀態不良,菌液濁度不夠的情況,可用營養瓊脂上的菌落重新接種BHI肉湯進行活化。
2、必須使用新鮮的BHI肉湯培養物
血漿凝固酶實驗必須使用新鮮的BHI肉湯培養物。“新鮮”應理解為,培養物從培養箱取出後,立即進行試驗。以保證培養物的酶活力良好。避免出現因取出一段時間後,因酶活力降低而引起的假陰性。
3、加入BHI肉湯培養物後,要輕輕轉動瓶身至混合均勻
兔血漿中加入BHI肉湯培養物後,要輕輕轉動瓶身至混合均勻,不要采取劇烈搖晃的方式。
4、試驗應每半小時觀察一次
不可直接觀察第6h後的結果。一些金葡菌能夠產生蛋白酶來分解纖維蛋白,而出現先凝集而後消融的情況,保證每半小時觀察一次,防止因觀察不及時,而誤判成假陰性。觀察凝固情況時,采用將西林瓶緩慢傾斜或倒置的方式。切記不要采用搖晃的方式進行觀察!當凝固體積大於原體積一半,即可判為陽性。
結果判斷:
編號
產品名稱
結果判斷
培養時間
備注
陽性
陰性
HB4117-4
兔凍幹血漿
全凝或凝固體積大於一半
不凝固
2-6h
接種肉湯培養物0.3ml於安瓿瓶內,充分混合,
置36±1℃培養,定時觀察是否有凝塊形成。
血漿凝固酶實驗操作視頻:/asphtml/video44.htm
不同細菌在凍幹兔血漿上的生化反應:
凍幹兔血漿微生物靈敏度試驗:
按標簽用法製備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養2-6小時。