蠟樣芽孢杆菌顯色培養基（第三代）

  蠟樣芽孢杆菌顯色培養基是青島betway必威西汉姆联生物公司改良的培養基，用於食品、水、乳製品和肉製品中蠟樣芽孢杆菌的快速檢測。改進型顯色劑和添加劑，特異性和靈敏度明顯提高。蠟樣芽孢杆菌顯藍綠色且菌落周圍有一不透明環，其它菌顯藍綠色、黃色或無色，革蘭氏陰性菌被抑製。 

成分（g/L）

特殊營養物質	20.0
顯色劑	0.5
抑菌劑	4.0
瓊脂	15.0
pH 7.0±0.2 25℃

蠟樣芽孢杆菌添加劑 3.0g（已配套，無需另購）

此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。

用法

稱取基礎培養基 7.95g,加入 180ml 蒸餾水，加熱溶解並不停攪拌；另取 0.6g 蠟樣芽孢杆菌添加劑，加入 20ml 無菌水，並加入一些玻璃球，不停振動 5-10min，使其乳化均勻，將二者分別於121℃高壓滅菌 15min。冷至 45-50℃左右時，把蠟樣芽孢杆菌添加劑加入基礎培養基中， 輕輕混勻，傾入無菌平皿。使培養基的厚度約為 1-2mm，這樣有利觀察不透明環。

操作步驟

1、按 GB 標準、SN 標準、FDA 標準或其它方法製備樣品液;

2、樣品液在 30±1℃ 增菌培養 18-24 小時；

3、取增菌液劃線接種於蠟樣芽孢杆菌顯色培養基平板上，36±1℃ 培養 18～24h。蠟樣芽孢杆菌典型菌落為藍綠色且菌落周圍有一不透明環。若 24 小時沒有出現典型菌落，可延長培養至 48 小時;

4、對可疑蠟樣芽孢杆菌可劃線接種到營養瓊脂平板上，30±1℃ 培養 18-24 小時，挑取單菌落做蠟樣芽孢杆菌全套生化試驗。

質量控製

1、外觀

此幹燥培養基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈乳白色。製備好的平板呈不透明無色固體培養基。

2、微生物試驗

在 36±1℃ 培養 18～24h 小時：

質控菌株	菌株號	生長情況	菌落顏色
蠟樣芽孢杆菌	CMCC63303	+++	深藍色且菌落周圍有一圈不透明環
蠟樣芽孢杆菌	ATCC11778	+++	藍綠色，菌落比較大，扁平，且菌落周圍有一圈不透明環
枯草芽孢杆菌	CMCC63501	++	白色,菌落周圍沒有不透明環
金黃色葡萄球菌	ATCC25923	-/+	白色
大腸杆菌	ATCC25922	-	白色

方法的局限性

本培養基鑒定蠟樣芽孢杆菌，有時可能會出現假陽性，需做其它補充試驗。蘇雲金芽孢杆菌在本培養基上顯色與蠟樣芽孢杆菌相同，但食品中一般很少。

典型特征

蠟樣芽孢杆菌典型菌落為藍綠色，菌落周圍有一不透明環

貯存

製備好的平板應立即使用，應避免光線直接照射。幹燥培養基應放置於陰暗幹燥處， 保存溫度 2-8℃，注意避光保存。

失效

幹燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。

注意

此培養基僅供實驗室使用。

參考文獻

1. P.R. Mortimer, G. McCann, Lancet, 1043 (1974)

2. E. Bouza, S. Grant, C. Jordan, et. al, Arch. Ophthamol., 97, 488 (1979)

3. K. Wohlgemuth, C.A. Kirkbride, E.J. Bicknell, R.P. Ellis, Am. Vet. Met, Ass., 161, 1691 (1972)

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關於蠟樣芽孢杆菌顯色培養基的倒平板技巧：/asphtml/refere9534.htm

蠟樣芽孢杆菌顯色培養基（第三代）微生物靈敏度試驗:

按標簽用法製備培養基，接種以下質控菌株，放置36±1℃需氧培養24-48小時。