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培養基
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改良羅氏培養基基礎

英文名稱:L-G medium Base,Modified
產品貨號:HB6250-1
產品規格:250g
產品價格:90元
保質期:三年
產品用途:用於結核杆菌的培養
備  注:

產品介紹:

用途:用於結核杆菌的分離培養。

成分(g/ 600ml):

磷酸二氫鉀
2.4
硫酸鎂
0.24
檸檬酸鎂
0.6
L-穀氨酸鈉
7.2
孔雀綠
0.4
馬鈴薯澱粉
30.0

用法

稱取本品49.84g,並吸取甘油12ml,加熱攪拌溶解於 600ml蒸餾水中,煮沸5-10分鍾,121℃高壓滅菌15分鍾取出。待冷至55℃左右時,以無菌操作加入無菌攪勻的全蛋液1000ml,混勻 ( 避免產生氣泡 ),分裝18mm×180mm試管,每管7ml,置成長斜麵 ,用 85-90℃流動蒸汽 1-1.5小時後,取出,放冷,備用。

注:培養基中含較多馬鈴薯澱粉,呈渾濁狀。

用法詳解:

(1)基礎培養基:稱取除全蛋液以外的成分加熱煮沸溶解於600mL純化水中,加熱過程需不停攪拌以防止馬鈴薯粉凝成塊或糊底,121℃滅菌15min,冷卻至55℃備用;

(2)全蛋液製備:將新鮮雞蛋洗刷外殼後,浸於5%碳酸鈉溶液中約30min,用清水衝洗後,浸泡於75%乙醇溶液中數分鍾,在無菌環境中用滅菌的鑷子或其他器具打破蛋殼,將蛋液倒入含玻璃珠的無菌錐形瓶中(可預先將玻璃珠放入錐形瓶中,121℃高壓蒸汽滅菌15-30min),充分搖晃使蛋黃、蛋白搖散混合均勻。

注:新鮮雞蛋內的蛋液通常是無菌的,無須進行滅菌處理,操作過程應注意避免汙染。若蛋液中可能殘存蛋殼碎渣,可將打散後的全蛋液用無菌紗布進行過濾。

(3)將1000mL全蛋液與600mL基礎溶液混合充分搖勻,無菌分裝於滅菌的試管中,每管5-7mL(視試管的大小調整裝量),擺長斜麵,用85-90℃流動蒸汽滅菌1-1.5h至斜麵完全凝固,取出冷卻後備用。製備好的羅氏培養基斜麵應呈微綠色或黃綠色。

注:不同於一般的培養基,此培養基中不使用瓊脂,而是通過蛋液的凝固效果製成固體培養基,因此硬度較低,且分枝杆菌生長周期長,為防止培養基過分失水變幹,通常使用試管製成斜麵使用而不是做成平板(平板通常培養3-5天後會有明顯失水變薄現象,而分枝杆菌通常需要培養數周的時間)。將蛋液與基礎培養基混合時,應緩慢倒入輕輕搖勻,防止產生過多氣泡。85-90℃的流動蒸汽可以保持蛋液中的維生素不被破壞,也可使用凝固器加溫至85-90℃,若無流動蒸汽滅菌器和凝固器,也可使用烘箱調節至85-90℃使培養基凝固。

改良羅氏培養基基礎(GB)微生物靈敏度試驗:

按標簽用法製備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養14-28天。

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