大腸杆菌O157：H7顯色培養基是青島betway必威西汉姆联生物公司改良的培養基，用於食品、病人糞便樣品中O157：H7菌的快速檢測。O157：H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周圍沒有藍色暈圈，大腸杆菌和大腸菌群顯暗藍色、藍色或紫色，菌落周圍有藍色暈圈；其它細菌顯藍色、黃色或無色。本培養基的特異性高，可以克服SMAC培養基引起的假陽性和假陰性結果，是一種很理想的快速檢測培養基。
成份(g/L)
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特殊營養物質
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68.4
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混合顯色劑
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2.6
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瓊脂
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15.0
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pH7.0±0.1 25℃
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CT添加劑 1ml/支*5（已配套，無需另購）
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。
用法
稱取本品17.2g 加入200ml 蒸餾水，加熱煮沸溶解並不停攪拌，加熱2分鍾左右。冷卻至45-50℃ 時，加入一支CT添加劑混勻，傾入無菌平皿。
注意：製備好的培養基一定要保持表麵幹燥，可在36℃ 的培養箱中倒置放置1-2小時。
原理
利用大腸杆菌O157 自身代謝產生的酶與相應顯色底物反應使菌落顯色，以區分目標菌與非目標菌。顯色底物是由產色因子和微生物部分可代謝物質組成，在特異性酶作用下，遊離出產色因子使菌落顯示一定顏色。
操作步驟
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法製備樣品液；
2、取 25 克樣品液加入 225ml mEC肉湯或mTSB肉湯中，36℃ 增菌培養 18-24 小時；
3、用 3mm 接種環取 1 環增菌液，劃線接種到O157菌顯色培養基上，做 2 個平板；
4、36℃ 培養 18-24h，O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周圍沒有藍色暈圈；大腸杆菌和大腸菌群顯暗藍色、藍色或紫色，菌落周圍有藍色暈圈；其它細菌顯藍色、黃色或無色；
5、對典型菌落可做O157:H7菌血清學試驗和全套生化試驗。
注：必須在 36℃ 培養 24 小時內判讀結果，以免菌落顏色發生變化。
質量控製
1、外觀
此幹燥培養基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈灰白色。製備好的平板呈藍色固體培養基。
2、微生物試驗
在 36℃ 培養 18-24h 小時：
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質控菌株
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ATCC
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生長情況
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菌落顏色
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大腸杆菌O157
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35150
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+++
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亮紅色
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金黃色葡萄球菌
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25923
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-/+
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黃色或無色
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大腸杆菌
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25922
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+/-
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暗藍色，菌落周圍有藍色暈圈
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沙門氏菌
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14028
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+++
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藍色
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奇異變形杆菌
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12453
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+/-
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無色
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肺炎克雷伯氏菌
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10031
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+/-
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藍色，菌落周圍有藍色暈圈
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弗氏檸檬酸鹽杆菌
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43864
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+/-
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藍色菌落有紫色中心，菌落周圍有藍色暈圈
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阪崎杆菌
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29004
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++
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紫色至藍色
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方法的局限性
本培養基上的典型大腸杆菌O157:H7必須做血清學試驗或生化試驗。
典型特征
典型大腸杆菌O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周圍沒有藍色暈圈；大腸杆菌和大腸菌群顯藍色或紫色，菌落周圍有藍色暈圈；其它細菌顯藍色、黃色或無色；
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O157顯色培養基
大腸埃希氏菌O157：H7 ATCC35150
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O157顯色培養基
大腸埃希氏菌O157：H7 ATCC43888
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貯存
製備好的平板可保存 2-5 天，應避免光線直接照射。幹燥培養基應放置於陰暗幹燥處， 保存溫度 2-8℃，注意避光保存。
失效
幹燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意
此培養基僅供實驗室使用。
參考文獻
1、Rappaport, F., and E. Henig. 1952. Media for the isolation and differentiation of pathogenic Escherichia coli (serotypes 0111 and 055). J. Clin. Pathol. 5:361-362.
2、 U.S. Food and Drug Administration. 1995. Bacteriological analytical manual, 8 th ed., AOAC International, Gaithersburg, MD.
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O157顯色培養基的微生物靈敏度試驗:
按標簽用法製備培養基，接種以下質控菌株，放置36±1℃需氧培養18-24小時。
相關資料：
操作視頻｜培養基的加熱滅菌操作（以XLD 、SC為例）-點擊查看實驗操作視頻
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O157顯色培養基的原理和使用方法 點擊查看
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